歡迎訪問北京智云達(dá)科技股份有限公司網(wǎng)站!
主營產(chǎn)品:農(nóng)殘檢測儀,獸藥檢測,水質(zhì)檢測,水發(fā)產(chǎn)品檢查,甲醛檢測,病蟲害檢測
產(chǎn)品系列
  • 微生物膠體金檢測卡系列
  • 食品安全快速檢測車
  • 食品微生物能力驗(yàn)證--菌落總數(shù)檢測操作過程分享

    點(diǎn)擊次數(shù):1282  更新時(shí)間:2023-11-24

    一、菌落總數(shù)小常識(shí)


    菌落總數(shù)的測定方法,看似非常簡單,但由于食品種類繁多,食品中可能存在的微生物菌群較多,要在同等條件下把所有的細(xì)菌培養(yǎng)出來,反應(yīng)樣品的真實(shí)情況,實(shí)屬不易。

    一、能力實(shí)驗(yàn)的目的

    開展能力驗(yàn)證試驗(yàn)是檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室檢測能力和提高檢測水平的重要手段。利用實(shí)驗(yàn)室間的比對,對實(shí)驗(yàn)室的校準(zhǔn)或檢驗(yàn)工作進(jìn)行判定。


    關(guān)鍵是,能力驗(yàn)證是考察實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)?zāi)芰Φ耐獠抠|(zhì)量活動(dòng),組織方提供試驗(yàn)樣本,在菌落總數(shù)項(xiàng)目上,一般會(huì)考慮增加上述難度。

     

    二、測定標(biāo)準(zhǔn)

     

    食品國家標(biāo)準(zhǔn):GB 4789.2-2022 《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測定》

     

    三、操作過程

     

    (一)前期做好充足的準(zhǔn)備工作

    根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn),提前準(zhǔn)備好要用的平板計(jì)數(shù)瓊脂、平皿、試管、稀釋液(生理鹽水)、三角燒瓶等。

     

    (二)樣品接受:

    收到樣品后,確認(rèn)樣品包裝是否完好,并將其保存在2~8℃冰箱中,然后在能力驗(yàn)證平臺(tái)進(jìn)行確認(rèn)。

     

    (三)樣品處理:

    按照作業(yè)指導(dǎo)書操作(一定要仔細(xì)閱讀作業(yè)指導(dǎo)書)看看是幾個(gè)樣品及實(shí)驗(yàn)記錄要求。一般實(shí)驗(yàn)室收到的是干粉樣品或者是固體樣品等。假如收到的是干粉樣品,那么第一步就要水化。

    樣品水化步驟(建議):一般能力驗(yàn)證樣品以國體粉末形式發(fā)放,以液體(CFU/mL)形式出報(bào)告。樣品水化前一定要認(rèn)真、仔細(xì)閱讀作業(yè)指導(dǎo)書,看看用多少稀釋液水化,水化后作為原液還是多大濃度的樣品來記錄。

     

    (四)實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:

    a、能力驗(yàn)證時(shí)最好在超潔凈臺(tái)或者生物安全柜里操作,這樣就要把超潔凈臺(tái)或者生物安全柜提前清理、消毒處理,確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境無菌。

    b、提前把要用到的平皿、試管、稀釋液等放到操作臺(tái)上。

     

    (五)實(shí)驗(yàn)操作:

    a、稀釋

    將樣品從冰箱中取出達(dá)到室溫后開啟使用,在超潔凈臺(tái)或者生物安全柜下先用少許稀釋液(選取的生理鹽水)進(jìn)行水化后吸入無菌瓶或袋中,再用剩余的稀釋液進(jìn)行洗滌并全部轉(zhuǎn)入無菌瓶或袋中。(具體公需多少稀釋液要看作業(yè)指導(dǎo)書說明)

    洗滌轉(zhuǎn)移時(shí)注意樣品瓶蓋的清洗和無菌操作,將全部的水化液進(jìn)行均質(zhì)混勻,一般作為原液立刻進(jìn)行接種;再取25mL到225mL稀釋液中均質(zhì)混勻,制成10-1梯度樣品勻液。

    1mL無菌吸管取1:10的樣液到9mL生理鹽水試管中,制成1:100的樣液,以此類推。再將幾個(gè)稀釋度的樣液接種到提前做好標(biāo)記的無菌平皿中。

     

    b、傾注平板

    將提前在水浴鍋里涼至48℃的平板計(jì)數(shù)營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基注入平皿約15mL,并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿,混合均勻。同時(shí)將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1mL稀釋液(不含樣品)的滅菌平皿內(nèi)作空白對照。傾注過程一般左手拿平皿,右手拿瓊脂瓶,左手將平皿打開30度左右的縫隙,傾注瓊脂大約到平皿底的二分之一處,左三圈、右三圈輕輕混勻,然后放到臺(tái)面上。

    待瓊脂凝固后,翻轉(zhuǎn)平板,置36±1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)48±2h。

     

    e、觀察計(jì)數(shù)

    最好,第二天先看看,檢測結(jié)果有沒有異常、是否有蔓延菌落出現(xiàn)。

    按照GB 4789.2的要求進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)

     

    f、上報(bào)數(shù)據(jù)

    在對結(jié)果進(jìn)行分析后,選取檢測結(jié)果的平均值進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)提交。

     

    注意事項(xiàng):

    a.一般能力驗(yàn)證的樣品添加的菌落濃度都比較高,檢測過程一定要多做幾個(gè)稀釋度,每個(gè)稀釋度多做幾個(gè)平板平行。

    b.梯度稀釋:是關(guān)鍵步驟,必須盡可能地減少誤差(新手建議渦旋混勻,渦旋時(shí)間不宜過長,長時(shí)間離心力等作用下,微生物細(xì)胞可能死亡)。

    c.傾注用培養(yǎng)基應(yīng)在48℃恒溫裝置內(nèi)保溫,溫度過高會(huì)影響細(xì)菌生長,過低瓊脂易于凝因而不能與菌液充分混勻。如無沒有恒溫裝置保溫,應(yīng)以皮膚感受較熱而不燙為宜。

    d.傾注培養(yǎng)基的量規(guī)定不一,從12~20mL不等,一般以15mL較為適宜,平板過厚可影響觀察,太薄又易于干裂。傾注時(shí),培基底部如有沉淀物,應(yīng)將底部棄去,以免與菌落混淆而影響計(jì)數(shù)觀察。

    e.傾注過程力度一定掌握好,絕不能把瓊脂濺出來。

    f.為使菌落能在平板上均勻分布,檢液加入平皿時(shí)要盡可能放在中央部位,然后應(yīng)盡快傾注培養(yǎng)基并旋轉(zhuǎn)混勻,可正反兩個(gè)方向旋轉(zhuǎn),檢樣從開始稀釋到傾注最后一個(gè)平皿所用時(shí)間不宜超過20min,以防止細(xì)菌有所死亡或繁殖。 

    g.瓊脂瓶放水浴鍋前一定要混合均勻,以防出現(xiàn)平皿不凝固現(xiàn)象;拿出傾注時(shí)要用噴有75%酒精的抹布擦拭干凈。

    h.冷卻的過程不要著急,冷卻充分后再倒置放進(jìn)培養(yǎng)箱培養(yǎng),放置的時(shí)候要盡量避免放到風(fēng)機(jī)口處,每摞不要超過6個(gè)平皿。

    i.檢驗(yàn)結(jié)束后所有的稀釋液樣品一定要放到冰箱里0-5℃冷藏,以備必須再用(一旦第二天發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)做錯(cuò)了,在做一次實(shí)驗(yàn),死馬當(dāng)活馬醫(yī))。

    在線客服

    聯(lián)系我們

    国产精品麻豆成人AV电影艾秋| 天天躁日日躁狠狠躁人妻| 久久久无码精品亚洲日韩蜜臀浪潮| 亚洲精品国产精华液| 99久久久无码国产精品性| 久久久久久久97| 日产精品高潮呻吟AV久久| 欧美+国产+日产+韩国| 国产一区二区波多野结衣| 亚洲清清爽爽AABB| 国产奶头好大揉着好爽视频| 欧美熟妇另类久久久久久多毛| 亚洲欧美自偷自拍另类小说| 欧美多人乱大交XXXXX变态| 45分钟做受片免费观看| 亚洲第一综合天堂另类专| 欧美精品中文字幕亚洲专区| 曰批全过程免费视频在线观看 | aaa欧美色吧激情视频| 中国无码人妻丰满熟妇啪啪软件| 色欲av午夜一区二区三区| 在线精品亚洲一区二区小说| 欧美大屁股xxxx| 欧美精品久久96人妻无码| 日韩精品无码一区| 久久久国产精品人人片| 好久不见在线观看免费高清| 色婷婷综合久久久久中文| 99久久精品国产免费| 中文无码人妻有码人妻中文字幕 | 蜜臀av夜夜澡人人爽人人| 免费看av| 亚洲 欧美 激情 小说 另类 | 免费av在线观看| 啦啦啦在线视频免费观看| 国产未成女YOUNV仙踪林| 色屁屁www影院免费观看入口| 高清播放器欧美大片| 中文字幕亚洲无线码在线一区| 中文乱码字慕人妻熟女人妻| 欧美性受XXXX白人性爽|