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  • 菌落總數(shù)檢測(cè)為什么平板計(jì)數(shù)瓊脂需要調(diào)節(jié)pH?

    點(diǎn)擊次數(shù):1436  更新時(shí)間:2024-06-19

     菌落總數(shù)檢測(cè)




    1.為什么平板計(jì)數(shù)瓊脂需要調(diào)節(jié)pH?
      由于大部分細(xì)菌是嗜中性的,培養(yǎng)基為符合細(xì)菌生長(zhǎng)要求,需要調(diào)節(jié)pH至7.0±0.2,盡量保證較適宜的環(huán)境,確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
    2.如何保證檢測(cè)結(jié)果的有效性?

    設(shè)計(jì)空白對(duì)照
    (1)檢驗(yàn)過(guò)程中需要做空白對(duì)照,用來(lái)判斷培養(yǎng)基、稀釋液、平皿或吸管是否存在污染,空白試驗(yàn)平板上應(yīng)該無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。

    實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求
    (2)定期檢測(cè)空氣潔凈度,判斷實(shí)驗(yàn)環(huán)境是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求。

    滅菌處理
    (3)細(xì)菌檢測(cè)過(guò)程中所用到的一切用具和培養(yǎng)基都需經(jīng)過(guò)滅菌程序。
    3.如何提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性?


    樣品消毒
    (1)任何樣品在打開(kāi)包裝前,都要在取樣開(kāi)口處的周?chē)砻孢M(jìn)行消毒。

    (2)采樣時(shí)對(duì)于易堵塞吸管的樣品(如糕點(diǎn)面包辣條等),可以放置一塊無(wú)菌紗布在放樣液的容器瓶口下方,作過(guò)濾用。


    稀釋度選擇
    (3)不同的食品其「菌落總數(shù)」的檢出也不一致,通常糕點(diǎn)類(lèi)樣品中細(xì)菌量偏低,稀釋度應(yīng)選擇較小的,稀釋度可選1:10 。

    糕點(diǎn)的菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)
    4.為什么瓊脂凝固后需要倒置?
      平板倒置培養(yǎng),可以減少培養(yǎng)基中水分的蒸發(fā)影響細(xì)菌生長(zhǎng),又可以防止凝結(jié)在皿蓋上的水蒸氣流到培養(yǎng)基表面導(dǎo)致染菌出現(xiàn)菌落蔓延及難以計(jì)數(shù)。
    5.為什么培養(yǎng)基干裂?
      干裂是培養(yǎng)基的水份缺失導(dǎo)致,通常2種原因:
    ?。?)培養(yǎng)箱內(nèi)部溫度不穩(wěn)定導(dǎo)致;
    ?。?)培養(yǎng)基倒得太薄。
    6.菌落蔓延的原因及解決辦法?
      菌落蔓延主要有兩個(gè)原因,一是操作不當(dāng);二是樣品中含有變形桿菌等運(yùn)動(dòng)性強(qiáng)的細(xì)菌。 

    操作中需要注意3個(gè)關(guān)鍵點(diǎn):
    (1)傾注培養(yǎng)基時(shí)搖晃平皿使其混合均勻,減少菌塊;
    (2)樣品稀釋后,盡快傾注平板。從稀釋到傾注結(jié)束時(shí)間控制在30分鐘之內(nèi),避免樣液干涸造成菌落成團(tuán);平板凝固后馬上倒置;
    (3)若樣品中含有變形桿菌,則可以覆蓋一層培養(yǎng)基(約4mL)。
    7.異常現(xiàn)象平板如何進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)?


    在完成培養(yǎng)后應(yīng)立即進(jìn)行計(jì)數(shù),通常選取30-300CFU菌落數(shù)、無(wú)蔓延菌落生長(zhǎng)的平板作為計(jì)數(shù),但實(shí)際操作中會(huì)出現(xiàn)各種異常現(xiàn)象。
      我們通過(guò)以下表格查看:
    現(xiàn)象
    計(jì)數(shù)方式
    無(wú)任何明顯界限的鏈狀菌落
    作為一個(gè)菌落
    有幾條不同來(lái)源的鏈
    每條鏈均應(yīng)按一個(gè)菌落計(jì)算
    片狀菌落不到平板一半,而另一半又分布均勻
    半個(gè)平板的菌落數(shù)乘2代表整塊平板的菌落數(shù)

    另外,當(dāng)所有稀釋度的平板均無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng),則檢測(cè)報(bào)告應(yīng)以低稀釋度報(bào)出,如低稀釋度為1,則報(bào)為<1;若低稀釋度為1:10,則報(bào)為<10,而不能報(bào)為「未檢出」。



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